(Flow cytometry, FCM) เป็นเครื่องวิเคราะห์เซลล์ที่วัดความเข้มของการเรืองแสงของเครื่องหมายเซลล์ที่มีสี มันเป็นเทคโนโลยีไฮเทคที่พัฒนาขึ้นอยู่กับการวิเคราะห์และการเรียงลำดับของเซลล์เดียว มันสามารถวัดและจำแนกขนาดโครงสร้างภายใน DNA, RNA, โปรตีน, แอนติเจนและคุณสมบัติทางกายภาพหรือทางเคมีอื่น ๆ ของเซลล์และสามารถขึ้นอยู่กับการรวบรวมการจำแนกประเภทเหล่านี้
Flow cytometer ส่วนใหญ่ประกอบด้วยห้าส่วนต่อไปนี้:
1 ห้องโฟลว์และระบบฟลูอิดิคส์
2 แหล่งกำเนิดแสงเลเซอร์และระบบรูปร่างลำแสง
3 ระบบออพติคอล
ระบบอิเล็กทรอนิกส์ 4 ระบบจัดเก็บการแสดงผลและการวิเคราะห์
5 ระบบการเรียงลำดับเซลล์
ในหมู่พวกเขาการกระตุ้นด้วยเลเซอร์ในแหล่งกำเนิดแสงเลเซอร์และระบบขึ้นรูปลำแสงเป็นการวัดหลักของสัญญาณฟลูออเรสเซนต์ในการไหลของไซโตเมทรี ความเข้มของแสงกระตุ้นและเวลาการเปิดรับแสงเกี่ยวข้องกับความเข้มของสัญญาณฟลูออเรสเซนต์ เลเซอร์เป็นแหล่งกำเนิดแสงที่สอดคล้องกันซึ่งสามารถให้ความยาวคลื่นเดี่ยวความเข้มสูงและความมั่นคงสูง มันเป็นแหล่งกำเนิดแสงกระตุ้นที่เหมาะสำหรับการตอบสนองความต้องการเหล่านี้
มีเลนส์ทรงกระบอกสองตัวระหว่างแหล่งกำเนิดเลเซอร์และห้องไหล เลนส์เหล่านี้มุ่งเน้นลำแสงเลเซอร์ที่มีหน้าตัดแบบวงกลมที่ปล่อยออกมาจากแหล่งเลเซอร์ลงในลำแสงรูปไข่ที่มีหน้าตัดเล็ก ๆ (22 μm× 66 μm) พลังงานเลเซอร์ภายในลำแสงรูปไข่นี้มีการกระจายตามการกระจายปกติเพื่อให้มั่นใจถึงความเข้มของการส่องสว่างที่สอดคล้องกันสำหรับเซลล์ที่ผ่านพื้นที่ตรวจจับเลเซอร์ ในทางกลับกันระบบออปติคัลประกอบด้วยเลนส์หลายชุดรูเข็มและตัวกรองซึ่งสามารถแบ่งออกเป็นสองกลุ่มได้: ต้นน้ำและปลายน้ำของห้องไหล
ระบบออปติคัลด้านหน้าของห้องไหลประกอบด้วยเลนส์และรูเข็ม ฟังก์ชั่นหลักของเลนส์และรูเข็ม (โดยปกติจะมีเลนส์สองเลนส์และรูเข็ม) คือการโฟกัสลำแสงเลเซอร์ด้วยรูปทรงกลมที่ปล่อยออกมาจากแหล่งกำเนิดเลเซอร์ลงในลำแสงรูปไข่ที่มีหน้าตัดเล็ก ๆ สิ่งนี้จะกระจายพลังงานเลเซอร์ตามการกระจายปกติทำให้มั่นใจได้ว่าความเข้มของการส่องสว่างที่สอดคล้องกันสำหรับเซลล์ทั่วพื้นที่ตรวจจับเลเซอร์และลดการรบกวนจากแสงจรจัด
ตัวกรองหลักสามประเภท:
1: Long Pass Filter (LPF) - อนุญาตให้แสงที่มีความยาวคลื่นสูงกว่าค่าเฉพาะที่จะผ่าน
2: ตัวกรองระยะสั้น (SPF) - อนุญาตให้แสงที่มีความยาวคลื่นต่ำกว่าค่าเฉพาะที่จะผ่าน
3: ตัวกรอง bandpass (BPF) - อนุญาตให้แสงในช่วงความยาวคลื่นเฉพาะที่จะผ่าน
การรวมกันของตัวกรองที่แตกต่างกันสามารถส่งสัญญาณการเรืองแสงที่ความยาวคลื่นที่แตกต่างกันไปยังหลอด photomultiplier แต่ละตัว (PMTs) ตัวอย่างเช่นตัวกรองสำหรับการตรวจจับการเรืองแสงสีเขียว (FITC) ที่ด้านหน้าของ PMT คือ LPF550 และ BPF525 ตัวกรองที่ใช้ในการตรวจจับการเรืองแสงสีส้ม-แดง (PE) ที่ด้านหน้าของ PMT คือ LPF600 และ BPF575 ตัวกรองสำหรับการตรวจจับเรืองแสงสีแดง (CY5) ด้านหน้าของ PMT คือ LPF650 และ BPF675
Flow cytometry ส่วนใหญ่ใช้สำหรับการเรียงลำดับเซลล์ ด้วยความก้าวหน้าของเทคโนโลยีคอมพิวเตอร์การพัฒนาทางภูมิคุ้มกันวิทยาและการประดิษฐ์เทคโนโลยีโมโนโคลนอลแอนติบอดีการใช้งานด้านชีววิทยาการแพทย์เภสัชศาสตร์และสาขาอื่น ๆ กำลังแพร่หลายมากขึ้นเรื่อย ๆ การใช้งานเหล่านี้รวมถึงการวิเคราะห์การเปลี่ยนแปลงของเซลล์, การตายของเซลล์, การพิมพ์เซลล์, การวินิจฉัยเนื้องอก, การวิเคราะห์ประสิทธิภาพของยา ฯลฯ
เวลาโพสต์: ก.ย. 21-2023
