(Flow cytometry , FCM ) คือเครื่องวิเคราะห์เซลล์ที่วัดความเข้มของแสงเรืองแสงของเครื่องหมายเซลล์ที่ย้อมสีเป็นเทคโนโลยีไฮเทคที่พัฒนาขึ้นจากการวิเคราะห์และการเรียงลำดับเซลล์เดี่ยวสามารถวัดและจำแนกขนาด โครงสร้างภายใน DNA, RNA, โปรตีน, แอนติเจน และคุณสมบัติทางกายภาพหรือทางเคมีอื่นๆ ของเซลล์ได้อย่างรวดเร็ว และสามารถอิงตามการรวบรวมการจำแนกประเภทเหล่านี้
Flow cytometer ส่วนใหญ่ประกอบด้วยห้าส่วนต่อไปนี้:
1 ห้องไหลและระบบฟลูอิกติกส์
2 แหล่งกำเนิดแสงเลเซอร์และระบบสร้างลำแสง
3 ระบบออปติคอล
4 ระบบอิเล็กทรอนิกส์ การจัดเก็บ จอแสดงผล และการวิเคราะห์
5 ระบบคัดแยกเซลล์
ในบรรดาสิ่งเหล่านั้น การกระตุ้นด้วยเลเซอร์ในแหล่งกำเนิดแสงเลเซอร์และระบบการสร้างลำแสงเป็นการวัดหลักของสัญญาณเรืองแสงในโฟลไซโตเมทรีความเข้มของแสงกระตุ้นและเวลาเปิดรับแสงสัมพันธ์กับความเข้มของสัญญาณเรืองแสงเลเซอร์เป็นแหล่งกำเนิดแสงที่สอดคล้องกันซึ่งสามารถให้แสงสว่างที่มีความยาวคลื่นเดียว ความเข้มสูง และมีความเสถียรสูงเป็นแหล่งกำเนิดแสงกระตุ้นที่เหมาะสำหรับการตอบสนองความต้องการเหล่านี้
มีเลนส์ทรงกระบอกสองตัวอยู่ระหว่างแหล่งกำเนิดเลเซอร์และห้องไหลเลนส์เหล่านี้โฟกัสลำแสงเลเซอร์ที่มีหน้าตัดเป็นวงกลมที่ปล่อยออกมาจากแหล่งกำเนิดเลเซอร์เป็นลำแสงทรงรีที่มีหน้าตัดเล็กกว่า (22 μm × 66 μm)พลังงานเลเซอร์ภายในลำแสงทรงรีนี้จะถูกกระจายตามการกระจายแบบปกติ เพื่อให้มั่นใจว่าเซลล์ต่างๆ ที่ผ่านพื้นที่การตรวจจับด้วยเลเซอร์จะมีความเข้มการส่องสว่างสม่ำเสมอในทางกลับกัน ระบบออพติคัลประกอบด้วยชุดเลนส์ รูเข็ม และฟิลเตอร์หลายชุด ซึ่งสามารถแบ่งคร่าวๆ ได้เป็นสองกลุ่ม: ต้นน้ำและปลายน้ำของห้องไหล
ระบบออพติคัลที่ด้านหน้าห้องไหลประกอบด้วยเลนส์และรูเข็มหน้าที่หลักของเลนส์และรูเข็ม (โดยปกติคือเลนส์สองตัวและรูเข็ม) คือการโฟกัสลำแสงเลเซอร์ที่มีหน้าตัดเป็นวงกลมที่ปล่อยออกมาจากแหล่งกำเนิดเลเซอร์ให้เป็นลำแสงทรงรีที่มีหน้าตัดที่เล็กกว่าสิ่งนี้จะกระจายพลังงานเลเซอร์ตามการกระจายแบบปกติ ทำให้มั่นใจได้ถึงความเข้มของการส่องสว่างที่สม่ำเสมอสำหรับเซลล์ทั่วพื้นที่การตรวจจับด้วยเลเซอร์ และลดการรบกวนจากแสงเล็ดลอด
ตัวกรองมีสามประเภทหลัก:
1: Long pass filter (LPF) - อนุญาตให้เฉพาะแสงที่มีความยาวคลื่นสูงกว่าค่าที่กำหนดเท่านั้นที่จะผ่านได้
2: Short-pass filter (SPF) - อนุญาตให้เฉพาะแสงที่มีความยาวคลื่นต่ำกว่าค่าที่กำหนดเท่านั้นที่จะผ่านได้
3: Bandpass filter (BPF) - อนุญาตให้แสงในช่วงความยาวคลื่นที่กำหนดเท่านั้นที่จะผ่านได้
การใช้ฟิลเตอร์ต่างๆ ร่วมกันสามารถส่งสัญญาณฟลูออเรสเซนซ์ที่ความยาวคลื่นต่างกันไปยังหลอดโฟโตมัลติพลายเออร์ (PMT) แต่ละหลอดได้ตัวอย่างเช่น ฟิลเตอร์สำหรับตรวจจับแสงสีเขียว (FITC) ที่ด้านหน้า PMT คือ LPF550 และ BPF525ฟิลเตอร์ที่ใช้ในการตรวจจับแสงเรืองแสงสีส้มแดง (PE) ที่ด้านหน้า PMT คือ LPF600 และ BPF575ฟิลเตอร์สำหรับตรวจจับแสงสีแดง (CY5) ที่ด้านหน้า PMT คือ LPF650 และ BPF675
Flow cytometry ส่วนใหญ่จะใช้สำหรับการเรียงลำดับเซลล์ด้วยความก้าวหน้าของเทคโนโลยีคอมพิวเตอร์ การพัฒนาภูมิคุ้มกันวิทยาและการประดิษฐ์เทคโนโลยีโมโนโคลนอลแอนติบอดี การประยุกต์ในด้านชีววิทยา การแพทย์ เภสัชกรรม และสาขาอื่น ๆ กำลังแพร่หลายมากขึ้นการใช้งานเหล่านี้รวมถึงการวิเคราะห์พลวัตของเซลล์ การตายของเซลล์ การพิมพ์ของเซลล์ การวินิจฉัยเนื้องอก การวิเคราะห์ประสิทธิภาพของยา ฯลฯ
เวลาโพสต์: Sep-21-2023
